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C02的功能及應(yīng)用領(lǐng)域

更新時(shí)間:2018-07-12      點(diǎn)擊次數(shù):1456

 使用注意事項(xiàng):

  1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),否則會(huì)損壞加熱元件。

  2、培養(yǎng)箱運(yùn)行數(shù)月后,水箱內(nèi)的水因揮發(fā)可能減少,當(dāng)?shù)退恢甘緹袅習(xí)r應(yīng)補(bǔ)充加水。先打開(kāi)溢水管,用漏斗接橡膠管從注水孔補(bǔ)充加水使低水位指示燈熄滅,再計(jì)量補(bǔ)充加 水,然后堵塞溢水孔。

  3、CO2傳感器是在飽和濕度下校正的,因此加濕盤(pán)必須時(shí)刻裝有滅菌水。

  4、當(dāng)顯示溫度超過(guò)置定溫度1℃時(shí),超溫報(bào)警指示燈亮,并發(fā)出尖銳報(bào)警聲,這時(shí)應(yīng)關(guān)閉電源30分鐘;若再打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)仍然超溫,則應(yīng)關(guān)閉電源并報(bào)維修人員。

  5、鋼瓶壓力低于0.2Mpa時(shí)應(yīng)更換鋼瓶。

  6、盡量減少打開(kāi)玻璃門(mén)的時(shí)間。

  7、如果培養(yǎng)箱長(zhǎng)時(shí)間不用,關(guān)閉前必須清除工作室水分,打開(kāi)玻璃門(mén)通風(fēng)24小時(shí)后在關(guān)閉。

  8、清潔培養(yǎng)箱工作室時(shí),不要碰撞傳感器和攪拌電機(jī)風(fēng)輪等部件.

  9、拆裝工作室內(nèi)支架護(hù)罩,必須使用隨機(jī)扳手,不得過(guò)度用力。

  10、搬運(yùn)培養(yǎng)箱前必須排除箱體內(nèi)的水,排水時(shí),將橡膠管緊套在出水孔上,使管口低于儀器,輕輕吸一口,放下水管,水即虹吸流出。

  11、搬運(yùn)培養(yǎng)箱前應(yīng)拿出工作室內(nèi)的擱板和加濕盤(pán),防止碰撞損壞玻璃門(mén)。

  12、搬運(yùn)培養(yǎng)箱時(shí)不能倒置,同時(shí)一定不要抬箱門(mén),以免門(mén)變形。

二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)

二氧化碳培養(yǎng)箱是在普通培養(yǎng)的基礎(chǔ)上加以改進(jìn),主要是能加入CO2,以滿足培養(yǎng)微生物所需的環(huán)境。主要用于組織培養(yǎng)和一些特殊微生物的培養(yǎng)。二氧化碳培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。
二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境如穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對(duì)濕度(95%),來(lái)對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。
在生物活體內(nèi),生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護(hù)細(xì)胞或組織,但是在體外培養(yǎng)時(shí),沒(méi)有任何保護(hù)自己的免疫屏障。對(duì)于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度、CO2和濕度,大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實(shí)驗(yàn)的需要。然而,針對(duì)培養(yǎng)過(guò)程中面臨的各種污染源,各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,因此細(xì)胞體外培養(yǎng)中zui大的威脅實(shí)際上是污染問(wèn)題。
對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō),非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的,而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵!
二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源:細(xì)菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原體、非同種細(xì)胞。
支原體:支原體污染后,因?yàn)樗鼈儾粫?huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長(zhǎng)期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細(xì)胞無(wú)明顯變化,外觀上給人以正常感覺(jué),實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細(xì)胞變形,影響DNA合成,抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等,往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視。
細(xì)菌:細(xì)菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會(huì)變色,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)。
病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離,丟棄處理,相對(duì)來(lái)說(shuō)容易處理,對(duì)操作者威脅較大;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長(zhǎng)的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了;目前沒(méi)有好的抑制方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。
非同種細(xì)胞:即細(xì)胞交叉污染,由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒(méi)有嚴(yán)格分開(kāi),往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。目前,世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無(wú)效。

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